Fluorestsentsi in situ hübridisatsioon
Fluorestsents- in situ hübridisatsiooni (FISH) on üks mitmest tehnoloogiast, mida kasutatakse rakkude DNA otsimiseks, otsides konkreetsete geenide või geenide osade olemasolu või puudumist.
Paljud erinevad vähivormid on seotud teadaolevate geneetiliste kõrvalekalletega. Ja geneetiliselt me ei räägi ainult pärilikkusest. Kogu elu jooksul võivad rakud jagada ja kasvada, kui nad eksivad.
Nendes rakkudes võib akumuleeruda vähiga seotud DNA-ga seotud mutatsioonid.
Kuidas FISH töötab?
FISH on meetod, mis kasutab fluorestsentssondid spetsiifiliste geenide või geenide osade (DNA järjestused) tuvastamiseks. Meditsiinikeskuse labori töötajad ja onkoloogid kasutavad FISHi, et aidata hinnata vähki põdevaid patsiente ja mõnikord jälgida patsienti, kellel on juba vähktõbi diagnoositud ja ravitud.
KALAD saab teha erinevate proovide abil vastavalt asukohale ja vähese vähi tüübile: perifeersest verest saadud luuüdi või bioloogilise lümfisõlmede biopsiast saadud kasvajarakud ja formaliini fikseeritud parafiini sisseehitatud kude (see viitab laboratooriumis töödeldud ja sisestatud vaha tüübist moodustatud koeproov, mis muudab selle jäigemaks, nii et seda saab lõigata õhukesteks osadeks ja paigaldada mikroskoobi all vaatamiseks).
Mida kirjad tähendavad?
FISHi H-tähistuses on hübridiseerimine.
Molekulaarse hübridiseerimise korral kasutatakse sondina märgistatud DNA-d või RNA-järjestust - visualiseerige punast Lego tellist, kui soovite. Sondit kasutatakse selleks, et leida vastav Lego tellis või DNA järjestus bioloogilises proovis.
Teie proovis olev DNA on nagu Lego telliste paljad, ja enamus nendest vaiadest ei vasta meie punasele sondile.
Ja kõik oma tellised on korrapäraselt koristatud 23 paari telliskivide hunnikutesse - kõik poolid on üks teie seotud homoloogilisest kromosoomist, rohkem või vähem. Erinevalt Lego tellistest on meie punane Lego sond nagu tugev magnetist ja leiab selle matši ilma kaarte sorteerimata.
"F" tähistab fluorestsentsi. Meie punane proovivõtt võib kukkuda telliste kolbides, nii et see on märgistatud värvilise fluorestsentsvärviga, nii et see särab. Kui see leiab oma seose 23 paari täppe vahel, ilmub selle fluorestsentsmärgi asukoht. Nii saate nüüd näha, kuidas teadlased ja arstid võivad kasutada FISH-i, et aidata kindlaks teha, kus (milline kile või mis kromosoom) konkreetne geen asub konkreetse indiviidi jaoks.
"I" ja "S" seisavad in situ . See viitab asjaolule, et meie punane Lego tellis otsib teie matši teie esitatud proovis .
Mis on spetsiifiliste vere vähide kohta?
FISHi ja muid in situ hübridiseerimisprotseduure kasutatakse erinevate kromosoomide kõrvalekallete diagnoosimiseks - geneetilise materjali muutused, muutused kromosoomides, sealhulgas järgmised:
Kustutamine - osa kromosoomist on kadunud
Translokatsioon - osa ühest kromosoomist puruneb ja kleebib teise kromosoomi
Inversioon - osa kromosoomist puruneb ja uuesti sisestatakse tagasi, kuid vastupidises järjekorras
Paljundamine - kromosoomi osa on lahtris liiga palju eksemplare
Igal vähitüübil võib olla oma kromosoomide muutuste komplekt ja asjakohased sondid. FISH mitte ainult aitab tuvastada esialgseid geneetilisi muutusi haiguseprotsessis nagu vähk, kuid seda saab kasutada ka ravivastuse jälgimiseks ja haiguste leevendamiseks.
FISHi poolt tuvastatud geneetilised muutused pakuvad mõnikord täiendavat teavet selle kohta, kuidas üksikisiku vähk tõenäoliselt käitub, lähtudes sellest, mida varem täheldati samasuguse vähiga ja sarnaste geneetiliste muutustega inimestel. Mõnikord kasutatakse FISHi pärast seda, kui diagnoos on juba tehtud, et koguda täiendavat teavet, mis võib aidata ennustada patsiendi tulemust või parimat ravi.
FIKS võib tuvastada kromosoomide kõrvalekaldeid leukeemiate , sealhulgas kroonilise lümfotsütaarse leukeemia (CLL) korral. Kroonilise lümfotsütaarse leukeemia / väikese lümfotsütaarse lümfoomi korral võimaldab FISH patsientidel välja selgitada nende prognostiline kategooria: hea, keskmine või halb. Akuutse lümfoblastse leukeemia (ALL) korral võib leukeemiliste rakkude geneetika teile rääkida vähktõve riskiastmest ja aidata juhtida raviotsuseid.
FISH-paneelid on saadaval ka lümfoomide, hulgimüeloomi, plasmarakkude proliferatsioonihäirete ja müelodüsplastilise sündroomi raviks. Näiteks mantelrakulise lümfoomi korral toimub translokatsioon, mille abil FISH tuvastab nimega GH / CCND1 t (11; 14), mis on sageli seotud selle lümfoomiga.
Miks FISH?
FISHi eeliseks on see, et seda ei pea tegema aktiivselt jagatavates rakkudes. Tsütogeneetiline testimine kestab tavaliselt umbes kolm nädalat, sest vähirakud peavad kasvatama laboriproovis umbes 2 nädala jooksul, enne kui neid saab testida. Vastupidiselt on FISHi tulemused tavaliselt mõne päeva jooksul saadaval laborist.
> Allikad:
> Vähktõve tsütogeneetilise testimise CPT koodid.
> Fluorestsentsi in situ hübridisatsioon (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorestsentsi in situ hübridisatsioon (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Hematoloogiliste häirete fluorestsentsi situatsiooni hübridisatsiooniuuringud. Molekulaardiagnostika ajakiri: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.